Tillämpning av HPLC-analys i rotationsindunstare

Högpresterande vätskekromatografi (HPLC) kallas också högtrycksvätskekromatografi, höghastighetsvätskekromatografi, högupplöst vätskekromatografi och modern kolonnkromatografi. Det är en effektiv och snabb analytisk separationsteknik som utvecklades snabbt på 1970-talet, och det är ett viktigt medel för modern separationstestning.

Högpresterande vätskekromatografi (HPLC) använder vätska som mobil fas och använder högtrycksinfusionssystem för att pumpa den mobila fasen, såsom ett enda lösningsmedel med olika polariteter eller blandad lösningsmedel och buffertlösning med olika proportioner in i den kromatografiska kolonnen med stationär fas. Efter att komponenterna i kolonnen separerats går de in i detektorn för detektion, för att genomföra analysen av provet.

Separationsmekanismen för högpresterande vätskekromatografi är densamma som för konventionell kolonnkromatografi, men packningen är finare och måste skjutas av högtryckspump, som har hög kolonneffektivitet och snabb analyshastighet. Till skillnad från gaskromatografi deltar även den mobila fasen i vätskekromatografi i separationsprocessen av komponenter, och dess sammansättning, proportion och pH-värde kan flexibelt justeras med olika separationslägen. I praktiken justeras retentionsvärdet och selektiviteten för prover i kromatografiska kolonn genom att ändra sammansättningen av mobil fas, så att olika prover kan separeras.

 

Komponenter i HPLC-analys

 

Kolumn: Kolonnen är kärnkomponenten i HPLC-systemet, som används för att separera föreningarna i provet. Vanliga separationskolonner inkluderar omvänd faskolonn, jonbytarkolonn, gelfiltreringskolonn, etc., och deras val beror på egenskaperna hos föreningen som ska separeras och analysens syfte.

Mobil fas: Mobil fas är en kombination av lösningsmedel som används i HPLC för att passera ett prov genom en separationskolonn. Den mobila fasen består vanligtvis av en blandning av lösningsmedel, som kan vara ett enda lösningsmedel eller en blandning av flera lösningsmedel i en viss proportion. Att välja rätt flöde är mycket viktigt för separationseffekten.

Pump: Pumpen används för att tillhandahålla den mobila fasen och trycka den genom separationskolonnen vid ett visst tryck. Vanliga pumpar inkluderar konstanttryckspump och gradientpump. Gradientpump kan realisera linjär eller icke-linjär förändring av mobilfassammansättning, för att få bättre separationseffekt.

Injektor: Injektor används för att införa provet som ska analyseras i HPLC-systemet. Provtagaren kan vara en manuellt manövrerad spruta eller en automatisk provtagare. De har vanligtvis egenskaperna för exakt volym och god repeterbarhet för att säkerställa korrekt provinjektion.

Kolumnugn: Kolonnugnen används för att reglera temperaturen på separationskolonnen. Genom att kontrollera temperaturen kan fördelningskoefficienten och separationshastigheten för provet i kolonnen ändras, vilket optimerar separationseffekten.

Detektor: Detektorn används för att detektera den separerade föreningen och generera en elektrisk signal relaterad till dess koncentration. Vanliga detektorer inkluderar ultraviolett-synlig absorptionsdetektor, fluorescensdetektor och elektrokemisk detektor. Valet av detektor beror på egenskaperna hos den substans som ska analyseras och kraven på detektionskänslighet.

Datainsamlingssystem: Datainsamlingssystemet används för att ta emot, registrera och analysera signalerna som matas ut av detektorn. Den kan omvandla den detekterade signalen till parametrar som topparea och retentionstid och ge analys och tolkning av resultaten.

 

Efter att lösningsmedlet avlägsnats avroterande förångareDet erhållna provet är vanligtvis koncentrerat eller fast. Om du vill analysera eller detektera föreningarna i provet ytterligare kan du analysera dem med högpresterande vätskekromatografi (HPLC).

Allmänna steg för analys av prover efter rotationsindunstning med HPLC

 

1. Provupplösning: lös provet efter rotationsindunstning i ett lämpligt lösningsmedel. Lösligheten hos ämnet som ska analyseras och kraven för HPLC-analysförhållanden bör beaktas vid val av lösningsmedel.

2. Beredning av standardlösning: Om kvantitativ analys behövs kan standardlösningen av föreningen som ska testas beredas för efterföljande korrigering och beräkning av analysresultaten.

3. Utför HPLC-analys: injicera provet i HPLC-systemet och sätt upp lämplig separationskolonn, mobil fas och detektor. Beroende på syftet med analysen, välj lämpliga metoder och parametrar, såsom flödeshastighet, temperatur och gradientprogram.

4. Datainsamling och analys: kromatogrammet för provet samlas in med HPLC-system och målföreningen kvantifieras eller identifieras enligt topparea, retentionstid eller andra relaterade parametrar. Standardkurvmetod och intern standardmetod kan användas för kvantitativ analys.

5. Resultattolkning: Enligt analysresultaten utvärderades föreningarna i provet kvalitativt och kvantitativt. Efter behov kan du generera rapporter eller registrera analysresultat.

 

Tillämpningen av rotovap i HPLC-analys har två praktiska betydelser

 

• Provkoncentration: I vissa fall kan koncentrationen av provet som ska analyseras vara för låg, så den kemiska rotationsindunstaren kan användas för att koncentrera provet för att öka detektionskänsligheten hos analyten i HPLC.
• Avlägsnande av lösningsmedel: I vissa prover kan lösningsmedel störa HPLC-analys, så det är nödvändigt att ta bort eller ersätta lösningsmedlen i proverna med lösningsmedel som är lämpliga för HPLC. Laboratoriets rotationsindunstare kan hjälpa till att avlägsna lösningsmedlet och omvandla provet till en form lämplig för HPLC-analys.

 

HPLC-analys ochroterande förångareär två ofta använda tekniker inom kemisk analys, och de har vissa skillnader och samband i princip och tillämpning.

 

Skillnad

 

Princip: HPLC är baserad på principen om vätskekromatografi, och separationen och kvantitativ analys realiseras genom interaktionen mellan den stationära fasen (kolonn) och den mobila fasen (lösningsmedel). Förångaren använder principen om uppvärmning och rotation för att förånga vätskeprovet snabbt och avlägsna lösningsmedlet, för att koncentrera provet eller ändra lösningsmedelsmiljön i provet.

Ansökningsfält: HPLC används i stor utsträckning inom kemi, farmaci, miljö och andra områden, och kan användas för separation, identifiering och kvantitativ analys av föreningar i komplexa blandningar; Rotationsindunstning används huvudsakligen i processen för provkoncentration, lösningsmedelsavlägsnande och provberedning, och används vanligtvis inom organisk syntes, naturlig produktextraktion, provberedning och andra områden.

Analyshastighet: HPLC-analys tar vanligtvis lång tid att separera och detektera prover, vilket kan ta flera minuter till flera timmar; Vakuum-rotationsindunstarenheten kan förånga vätskeprover snabbt på kort tid, vanligtvis bara några minuter.

 

Ansluta

 

Provbehandling: Rotationsindunstare används ofta för att koncentrera prover eller ta bort lösningsmedel under provberedningen för att göra prover lämpliga för ytterligare analysmetoder, såsom HPLC. Effekten och noggrannheten av HPLC-analys kan förbättras genom att koncentrera provet och avlägsna lösningsmedlet med rotationsindunstare.

Val av lösningsmedel: I HPLC-analys är valet av lösningsmedel mycket viktigt för separationseffekten; Deroterande förångarekan hjälpa till att avlägsna lösningsmedlet från provet och omvandla provet till en form som lämpar sig för HPLC-analys. Därför kan rotationsindunstaren tillhandahålla tillfredsställande lösningsmedelsförhållanden för HPLC-analys.

 

Vi tillhandahåller manuella lyft rotovap och elektriska lyft rotovap, vänligen kontakta osssales@achievechem.comatt skräddarsy din egen roterande förångningsmaskin.