Låghastighetscentrifug
Beskrivning
Tekniska parametrar
A låghastighetscentrifugsnurr för att skapa centrifugalkraft som skiljer komponenter med olika tätheter i ett prov. Under cellseparation separeras celler, cellfragment och andra biomolekyler på olika platser med centrifugalkraft, beroende på deras massa och densitet. Specifikt, när provröret roteras med hög hastighet inuti centrifugrotorn, är centrifugalkraften på de olika komponenterna i blandningen proportionell mot deras massa och påverkas också av rotationens hastighet och radie. Större celler eller partiklar kastas mot botten av centrifugröret, medan mindre komponenter kvarstår i det övre skiktet. Denna princip för separation baserad på densitet och massa gör låghastighetscentrifuger till ett idealiskt verktyg för cellseparation.
Förfarande av låg hastighetscentrifug vid cellavskiljning
| ◇Provberedning: Först måste du förbereda cellprovet för att separeras. Detta inkluderar vanligtvis cellkulturer, blodprover eller andra biologiska prover som innehåller celler. Se till att provet har förbehandlats korrekt före centrifugering, såsom utspädning, matsmältning eller filtrering. ◇ Välj det högra centrifugröret: Välj det högra centrifugröret beroende på provets volym och centrifugalkraften.Låghastighetscentrifugs stöder vanligtvis en mängd olika centrifugrör, såsom 15 ml, 50 ml eller 100 ml. Se till att centrifugalröret är av god kvalitet och förseglas för att undvika läckage under centrifugalprocessen. ◇Balanseringsprover: Innan du placerar prover i centrifugen måste du se till att proverna i alla centrifugrör har lika eller liknande massa. Detta kan göras genom att väga provmassan i varje centrifugrör. Provbalans är avgörande för att förhindra att centrifugen genererar vibrationer och brus under drift. |
|
|
|
◇ Ställ in centrifugalparametrar: Enligt de experimentella kraven ställer du in lämplig centrifugalhastighet och tid. Hastighetsområdet för låghastighetscentrifuger är vanligtvis mellan 300 varv per minut och 10, 000 rpm, och tiden kan justeras enligt typen av prov och den önskade separationseffekten. ◇ Starta centrifugen: Placera det balanserade centrifugröret i centrifugens rotor och stäng locket på centrifugen. Starta sedan centrifugen och centrifugen enligt de inställda parametrarna. Under centrifugprocessen, var uppmärksam på centrifugens löpande tillstånd för att säkerställa att det inte finns någon onormal vibration eller brus. ◇ Samla in och bearbeta proverna efter separering: Efter centrifugering, stäng av centrifugen och vänta på att den ska stanna helt. Centrifugröret avlägsnas sedan försiktigt och supernatanten och cellutfällningen samlas in i separata behållare med ett lämpligt verktyg, till exempel en pipett. Beroende på experimentets behov kan cellutfällningen rengöras, odlas eller analyseras. |
Överväganden om låg hastighetscentrifug i cellseparation
● Att välja rätt centrifugalhastighet och tid: Valet av hastighet och tid är avgörande för effektiviteten i cellseparationen. För hög en rotationshastighet kan leda till cellbrott eller skador, medan för lång tid kan leda till cellaggregering eller ofullständig nederbörd. Därför bör valet av centrifugalparametrar övervägas enligt cellernas typ, storlek och densitet.
● Se till att provbalansen: Provbalans är nyckeln till att förhindra att centrifugen genererar vibrationer och brus under drift. Vid placering av prover är det nödvändigt att se till att proverna i alla centrifugrör har lika eller liknande massa. Om det finns en stor skillnad i provkvalitet kan en lämplig mängd buffert eller normal saltlösning läggas till det lättare centrifugröret för att uppnå balans.
● Välj det högra centrifugröret: Kvaliteten och tätheten hos centrifugröret har också en viktig inverkan på effektiviteten av cellseparation. Centrifugalrör av hög kvalitet har god tätning och korrosionsbeständighet, vilket effektivt kan förhindra provläckage och förorening. Samtidigt måste specifikationen av centrifugalröret också väljas enligt provets volym och den erforderliga centrifugalkraften.
● Var uppmärksam på underhåll och underhåll av centrifugen: Rengör regelbundet centrifugalkammaren och rotorn i centrifugen för att förhindra återstående föroreningar av prov. Torka ren i tid efter användning för att undvika korrosion orsakad av flytande rest. Samtidigt är det också nödvändigt att regelbundet kontrollera nätsladden och pluggen och andra komponenter i centrifugen för att säkerställa att de är intakta och undviker säkerhetsrisker.
Tillämpning av låg hastighetscentrifug i bioteknik
● Cellbehandling inom genteknik: I genteknik måste celler ofta odlas, transfekteras, screenas och andra behandlingar. Låghastighetscentrifuger kan användas för sådana steg som koncentration och tvätt av cellsuspensioner, samt insamling av celler efter transfektion. Genom centrifugering kan föroreningar och otransfekterade celler i cellodlingsmediet avlägsnas och effektiviteten och renheten av gentransfektion kan förbättras.
● Proteinrening och isolering: I proteinforskning måste specifika proteiner renas från komplexa biologiska prover. Låghastighetscentrifuger kan användas för initial förtydligande av proteinlösningar och avlägsnande av föroreningar, såsom cellskräp, nukleinsyror, etc. Genom centrifugalbehandling kan en relativt ren proteinlösning erhållas, vilket ger grunden för efterföljande reningssteg.
● Isolering och rening av viruspartiklar: Viruspartiklar har vanligtvis en specifik densitet och storlek och kan separeras och renas med låghastighetscentrifuger. Till exempel i virologiforskning kan virala partiklar separeras från cellkulturer med användning av differentiell centrifugering. Denna metod drar nytta av skillnader i centrifugalkrafter med olika hastigheter för att separera virala partiklar från andra cellulära komponenter.
● Produktion och kvalitetskontroll av biologiska läkemedel: I produktionsprocessen av biologiska läkemedel används ofta låghastighetscentrifuger för att förtydligas av cellodlingsvätskan, avlägsnande av cellskräp och den initiala separationen av läkemedelsprodukter. I kvalitetskontroll av läkemedel kan dessutom låghastighetscentrifuger också användas för att upptäcka viktiga indikatorer såsom storleksfördelning och stabilitet hos läkemedelspartiklar.
Tillämpning av låg hastighetscentrifug i viruspartikelseparation
◇ Primär separering: Centrifuger med låg hastighet används ofta för primär separering av viruspartiklar. I processen med virusekstraktion kan stora partiklar såsom cellfragment och föroreningar avlägsnas genom låghastighetscentrifugering och relativt ren virussuspension kan erhållas. Detta steg underlättar de efterföljande reningsstegen.
◇ Virusanrikning: I vissa fall kan låghastighetscentrifuger också användas för virusberikning. Genom att justera centrifugetiden och hastigheten kan viruspartiklarna deponeras i botten av centrifugröret, så att det koncentrerade virusprovet kan erhållas genom att extrahera supernatanten. Det bör emellertid noteras att anrikningseffekten av låghastighetscentrifuger är relativt begränsad, och vid tillfällen där högrenvirus krävs krävs andra reningsmetoder vanligtvis.

I kombination med andra reningsmetoder
● Differentialcentrifugalmetod: Differentialcentrifugalmetod är en metod för att separera partiklar i olika storlekar och densiteter med olika hastigheter och centrifugaltider. Differentialcentrifugering används ofta för att ytterligare ta bort föroreningar och koncentrera viruset under virusrening. Efter avlägsnande av stora partiklar såsom organeller genom låg hastighetscentrifugering fälls viruspartiklarna ut genom hög hastighetscentrifugering.
● Densitetsgradientcentrifugeringsmetod: Densitetsgradientcentrifugeringsmetod är användningen av media med olika densiteter för att bilda en gradient, så att partiklar med olika densiteter nöjer sig med olika positioner i gradientmetoden. Vid virusrening används ofta densitetsgradientcentrifugering för att separera viruspartiklar från andra föroreningar med liknande densitet (såsom proteiner, nukleinsyror, etc.). Genom att framställa densitetsgradienten i centrifugröret i förväg och sedan lägga till virussuspensionen på ytan av lutningen för centrifugering kommer viruspartiklarna att sedimentera i en specifik position i lutningen för att bilda en sedimentationszon.
● Utfällningsmetod: Metoden för nederbörd är att fälla ut viruspartiklarna genom att tillsätta kemiska reagens. Vanliga utfällningsmedel inkluderar ammoniumsulfat, polyetylenglykol (PEG), etc. Utfällningsmetoden kan användas för ytterligare rening av viruset. Genom att justera utfällningens koncentration och pH -värde kan viruspartiklarna selektivt fälls ut för att avlägsna föroreningarna.
● Filtreringsmetod: Filtreringsmetod är en metod för att separera viruspartiklar från andra föroreningar genom gelfiltreringskromatografikolumn. Gelfilterkromatografisk kolonn separeras efter partikelstorleken, och de stora molekylerna flyter ut ur den kromatografiska kolonnen först, och de små molekylerna flyter ut senare. Genom att välja lämpliga gel- och kromatografiska förhållanden kan viruspartiklar effektivt separeras från andra föroreningar.
● Elektroforetisk metod: Elektroforetisk metod är användningen av elektriska fältverkan för att göra laddade partiklar i metoden för elektrisk fält. Vid virusrening används elektrofores ofta för att separera virala partiklar från andra laddade föroreningar. Effektiv separering och rening av viruspartiklar kan uppnås genom att välja lämpliga elektroforesbetingelser och media.
Populära Taggar: Låghastighetscentrifug, Kina Låghastighetscentrifugtillverkare, leverantörer, fabrik
Ett par
Lab tre rullkvarnNästa
LabbcentrifugmaskinSkicka förfrågan













